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TSK-Gel凝胶色谱柱清洗方法
更新时间:2018-06-15   点击次数:3969次

      亲水性乙烯基树脂基质蛋白分离用色谱柱,除了可选用键合了离子交换基团的离子交换柱外,还可选用疏水反应、亲和等其他多种类型的柱子。
     许多的类型的液相色谱柱,其充填导电介质生物体学固定性处理好,不会出现会因为官能基离开而影响样板成分洗刷位置上变幻的时候。无论怎样怎样的,会因为柱子的不间断动用,在长时候动用后,样板成分的洗刷时候依然是会出现变更的。其其原因与样板中极少量的附吸物在柱中的蓄积有关系。格外会因为生物体样板成分非常复杂,这一活性炭溶解时候时有出现。(非特女性朋友活性炭溶解)当分析到怎样的时候后,应动用适宜的有机溶剂将蓄积的活性炭溶解有机物洗去,以恢复如初柱子的功能。

1、0.1-0.2mol/L NaOH水溶液(ABA-5PW柱不适用)
测定状态下,用0.1-0.2mol/L的NaOH水溶液通过样品进样阀清洗数次(3-5回)。
2、20-40% 醋酸水溶液
与上述NaOH水溶液的清洗方法相同。
3、在淋洗液中添加水溶性有机溶剂(疏水性吸附物质的去除)
在淋洗液中添加甲醇、乙腈等水溶性有机溶剂(浓度《20%)进行过柱清洗。(注意盐的析出)
4、在淋洗液中添加尿素、中性界面活性剂(难溶性蛋白的去除)
在淋洗液中添加6-8mol/L的尿素或0.2-0.3%的中性界面活性剂(Triton、Tween、Brij等)后进行过柱清洗。但需注意尿素及界面活性剂的柱中残留。

     通常情况下,使用方法1和2便可将吸附物质去除。如果方法1和2不能恢复柱效,则可使用方法3和4。注意,在附吸成分其吸附力较强时,即使进行过清洗,柱性能也有可能得不到恢复。

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